อาการคันในเวลากลางคืนในบริเวณรอบ ๆ ของทารกแสดงให้เห็นอย่างชัดเจนว่าติดเชื้อพยาธิเข็มหมุด การวินิจฉัยทำได้โดยการระบุตัวหนอนหรือไข่ของมัน พยาธิเข็มหมุด บางครั้งอาจพบพยาธิบนผิวหนังใกล้ทวารหนักหรือบนเสื้อผ้าชั้นใน ชุดนอน หรือผ้าปูที่นอนประมาณ 2 ถึง 3 ชั่วโมงหลังจากหลับไป สามารถเก็บและตรวจไข่พยาธิเข็มหมุดได้โดยใช้ "การทดสอบด้วยเทป"